食品微生物學小型化檢測分析光學顯微鏡
小型化檢測儀器和檢測工具的發(fā)展
在食品微生物學中,對正常菌群、腐敗組織、食源性病原菌、發(fā)酵
劑等進行的微生物學檢測鑒定是應用微生物學的重要組成部分。傳統(tǒng)
檢測方法有一百多年的歷史,即采用大量培養(yǎng)基(10m或是更多)來研究
細菌的某一特性(例如,采用乳糖肉湯來培養(yǎng)大腸桿菌并進行乳糖發(fā)酵
實驗)。將待測微生物接種到試管中很麻煩,因為一次只能接管。很多
微生物學家設(shè)計了合適的容器和更小的試管來進行這些實驗,以減少培
養(yǎng)基的使用量。該作者系統(tǒng)地開發(fā)了許多適用于微孔板的簡化方法來
減少試劑和培養(yǎng)基的使用量(從5~10mL減少到約0.2m),該微孔板有96個
孔,按8×12的格局排列。該系統(tǒng)的基本組件包括經(jīng)過商業(yè)滅菌的微孔
板(用來盛放待測培養(yǎng)物)、批量接種設(shè)備、用來盛放固體培養(yǎng)基的容
器(大 Petri盤),以及液體培養(yǎng)基(盛放于另一種微孔板中,每孔可裝0.
2mL液體培養(yǎng)基)。
把待測液體培養(yǎng)物(純培養(yǎng)物)導入無菌微孔板的孔中以制成樣板(
每孔0.2m)。微孔板最多可容納96個不同的培養(yǎng)物,或48對相同培養(yǎng)物
或期望的多種組合。采用無菌多頭接種器(從同一板上伸出的96個吸頭
)將這些培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到固體或液體培養(yǎng)基中。接種器采用酒精火焰滅菌
,每一次轉(zhuǎn)移相當于傳統(tǒng)方祛的96次獨立接種。經(jīng)合適的溫度培養(yǎng)后,
固體或液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)物的生長情況能被觀察并記錄下來,對所得數(shù)
據(jù)可以進行分析。這些方法適合于研究大量的獨立菌落,或?qū)Υ郎y樣品
中大量微生物進行研究。該作者采用此小型化系統(tǒng)從肉類和其他食品
中鑒定出數(shù)以千計的細菌,研究了有機染料對酵母和細菌的影響,對多
種組分中的微生物進行了具有挑戰(zhàn)性的研究并取得了很好的結(jié)果。這
些系統(tǒng)中的大多數(shù)最初用于腸道菌檢測(如沙門菌屬、志賀菌屬、變形
桿菌屬、腸桿菌屬等)。后來,許多公司擴大了檢測系統(tǒng)的檢測范圍,以
便鑒定非發(fā)酵菌、厭氧菌、革蘭陽性菌,甚至酵母和霉菌。起初,需要
一名分析人員來讀出每個小孔中反應的顏色,然后對照人為制定的編碼
來識別微生物。
在許多實驗室,自動稀釋儀已廣泛地應用于快速、準確的樣品稀釋,
液體轉(zhuǎn)移到微孔板已實現(xiàn)自動化;②普遍使用的微管自動讀數(shù)器能有效
地讀出微管中液體的混濁度、顏色以及熒光性來計算MPN值;③一流的
數(shù)學模型,計算機解析和結(jié)果打印輸
